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免疫熒光技術(shù)的使用方法

更新時間:2013-08-15   點擊次數(shù):1911次


免疫熒光技術(shù)的使用方法:

(1)直接熒光法  將熒光素標記在相應(yīng)的抗體上,直接與相應(yīng)抗原反應(yīng)。其優(yōu)點是方法簡便、特異性高,非特異性熒光染色少;缺點是敏感性偏低,而且每檢查一種抗原就需要制備一種熒光抗體。此法常用于細菌、病毒等病原微生物的快速鑒定。

(2)間接熒光法  用一抗與標本中抗原結(jié)合,再用熒光素標記的二抗染色。該法優(yōu)點是敏感度比直接法高,制備一種熒光素標記的二抗即可用于多種抗原的檢查,但非特異性反應(yīng)亦增加。染色程序分為兩步,首先用未知未標記的抗體(待檢標本)加到已知抗原標本上,在濕盒中37℃保溫30min,使抗原抗體充分結(jié)合,然后洗滌,除去未結(jié)合的抗體;然后加上熒光標記的抗球蛋白抗體或抗IgG、IgM抗體。如果*步發(fā)生了抗原-抗體反應(yīng),標記的抗球蛋白抗體就會和已結(jié)合抗原的抗體進一步結(jié)合,從而可鑒定未知抗體。  由于免疫熒光技術(shù)的特異性、快速性和在細胞和分子水平定位的敏感性與準確性,在動物檢驗檢疫方面得到了廣泛應(yīng)用。
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