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人髓磷脂堿性蛋白elisa試劑盒

更新時間:2022-08-11

簡要描述:

上海恒遠生物長期供應高質(zhì)量“人髓磷脂堿性蛋白",具有靈敏度高,操作方便,檢測速度快等優(yōu)點,種屬齊全,現(xiàn)貨供應,物美價廉,提供完整的售前,售中售后服務,歡迎各位新老客戶惠顧!

型號:人MBP試劑盒96人份/48人份點擊量:1049

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科研ELISA檢測試劑盒.本公司可提供實驗代測服務.
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產(chǎn)品名稱:人髓磷脂堿性蛋白    
英文名稱:Human myelin basic protein,MBP ELISA KIT

產(chǎn)品規(guī)格:96人份/48人份
各種種屬:人、大小鼠、豚鼠、兔子、豬、犬、牛、羊…
標本齊全:血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿、組織液、關節(jié)液、胸腔溢液等…
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個月
運輸條件低溫運輸,用干冰或者冰袋低溫運輸。

腦脊液髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein in CSF )

【參考范圍】
比色法:0~4μg/L。
【影響因素】
1.標本不宜污染。
2.如不能及時處理,應冷凍保存。
【臨床意義】
1.正常CSF中骨髓鞘堿性蛋白(MBP)含量極微,MBP中的脂質(zhì)與蛋白質(zhì)含量分別占70%與30%。檢測其在CSF中的含量,對脫髓鞘病的診斷及探索其病因有一定價值。
2.MBP增高主要見于多發(fā)性硬化癥。多發(fā)性硬化癥的急性期都表現(xiàn)為MBP明顯增高,慢性活動者,約50%有MBP升高,但非活動者不增高。此外;MBP增高也可見于其他脫髓鞘病,如橫貫性脊髓炎合并系統(tǒng)性紅斑狼瘡、腦橋中心髓質(zhì)溶解癥及甲氨蝶呤髓病等。
3.結合CSF中酶學及IgG測定,可提高對多發(fā)性硬化癥的診斷以及病程、療效等的觀察。


ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領域。   
(一)原理
  ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩(wěn)定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。   
(二)操作步驟
     方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
  1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
  2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
  3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時,洗滌。
  4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
  5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
  6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
  方法二 用于檢測未知抗體的間接法:   
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜。
2、次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。同時做空白、陰性及陽性孔對照于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW(超純水)洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
3. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
4. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
5. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測O?D值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔O?D值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。

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